Микроскопическое (бактериоскопическое) исследование мазка, окрашенного по Граму

Анализы
Молекулярная Диагностика
Микроскопическое (бактериоскопическое) исследование мазка, окрашенного по Граму

Описание

Бактериоскопия (от лат. «скопео» – смотрю) – лабораторный метод исследования бактерий под микроскопом. Метод широко используется врачами разных специальностей при подозрении на инфекционный процесс и наличии гнойно-воспалительных проявлений заболевания, а также при диспансерных обследованиях в гинекологической и акушерской практике.
При микроскопии в мазках можно обнаружить бактерии, грибы (при кандидозе), простейшие (при трихомониазе). Важными моментами при проведении исследования являются оценка морфологии, т. е. формы бактерий, их размеров и расположения. Важными также являются количество (от скудного до массивного) и отношение к красителям (грамположительные и грамотрицательные клетки).

Нормальной флорой при исследовании гинекологических мазков являются грамположительные палочки, которые в результате описываются как лактоморфотипы. При бактериальном вагинозе микробная флора представлена обильной мелкой коккобациллярной грамвариабельной флорой и характеризуется снижением лактоморфотипов. При гонорее в мазке присутствуют грамотрицательные кокки бобовидной формы, расположенные парами внутри и внеклеточно. При других гнойно-воспалительных состояниях (неспецифических) могут встречаться грамположительные кокки, грамотрицательные палочки. В мазках учитываются также наличие эпителия, присутствие ключевых клеток и количество лейкоцитов.

В мокроте имеют значение грамположительные кокки, слегка вытянутые, в капсуле, расположенные парами, морфологически сходные с пневмококками, или мелкие неодинаковой формы грамотрицательные палочки, сходные с гемофилами, а также грамотрицательные кокки, расположенные поодиночке, что может говорить в пользу наличия бранхамелл.

В мазках из ран чаще всего встречаются грамположительные кокки.

Однако с помощью микроскопического исследования нет возможности дать заключение о названии бактерий. Для определения рода и вида бактерий требуется проведение бактериологического посева.

Показания к исследованию

Инфекционно-воспалительные заболевания:

мочеполовых путей;
лёгких;
ЛОР-органов;
глаз (при подозрении на гонококковую инфекцию);
кожи, мягких тканей и др.;
обследование женщин при беременности и по показаниям при профилактических осмотрах; при диагностике бактериального вагиноза;
дополнительное исследование к посевам на анаэробную инфекцию.

Подготовка

Условия подготовки определяются лечащим врачом.

Инструкция по сбору мокроты:
1. Выделившуюся мокроту собрать в стерильный контейнер с красной крышкой.
2. Крышку плотно закрыть, чтобы биоматериал не вытек.
3. Если мокрота отделяется плохо, накануне можно принять отхаркивающие
средства (по согласованию с врачом!).

Правила забора клинического материала из урогенитального тракта
У женщин при исследовании материалов из урогенитального тракта взятие образцов желательно проводить приблизительно в середине менструального цикла (если заболевание не имеет явных проявлений) или в дни, когда нет кровянистых выделений при обострении процесса); у мужчин при исследовании материалов взятие образцов из уретры необходимо проводить при условии задержки мочеиспускания не менее 3-4 часов; если нет возможности придерживаться упомянутых условий, то следует помнить, что это может повлиять на качество мазков и исказить интерпретацию результатов микроскопии. Всегда необходимо учитывать, что проведение системной терапии, особенно антибактериальными препаратами, может значительно повлиять на результат микроскопического исследования и снизить его диагностическую ценность. Перед взятием образца важно понимать, какой материал должен быть взят, и что предполагается обнаружить. Обычно во время обследования пациента необходимо брать несколько клинических образцов (не только для микроскопии, но также и для других лабораторных исследований). Важно помнить, что: Материал из уретры для микроскопического исследования берется раньше всех других уретральных образцов сразу же после взятия выделений или проб для культурального исследования на гонококки.

Если имеются обильные выделения и подозревается трихомонадная или кандидозная инфекция, образец берется из заднего свода, где концентрация предполагаемого инфекционного агента наибольшая. Если количество выделений обычное, образец следует брать с боковой стенки влагалища. Этот клинический материал даст наиболее надежную информацию о состоянии влагалища в данный момент. Образец из шейки матки для микроскопического исследования берется раньше всех других цервикальных образцов или сразу же после взятия мазка для культурального исследования на гонококки. Мазок наносится на предметное стекло тонким слоем. Если количество материала небольшое, или Вы хотите поместить на одно стекло несколько образцов материала из разных локализаций у одного пациента, материал должен наноситься ближе центру стекла в заранее обозначенных областях.

Все мазки, приготовленные для направления в лабораторию, должны быть высушены на воздухе, промаркированы и, при необходимости, зафиксированы.

Правила забора клинического материала у мужчин для микроскопического исследования

Образец из уретры для окрашивания по Граму или метиленовым синим берется с помощью бактериологической петли объемом мкл. У мужчин при наличии выделений из уретры поверхность головки и область наружного отверстия уретры должны быть очищены с помощью марлевого тампона, и крайняя плоть отведена назад для предупреждения контаминации. При отсутствии свободных выделений необходимо попросить пациента слегка помассировать уретру скользящими движениями от основания пениса к его головке. В этом случае может быть использован ватный/дакроновый тампон для взятия материала. После введения пластиковой петли в уретру на -2 см необходимо плоскость «глазка» петли двигать к отверстию, слегка нажимая на стенки уретры. Не рекомендуется вращать петлю во время процедуры взятия образца. Для пациента это болезненно. После получения клинического материала петля накладывается на поверхность стекла и передвигается по нему несколько раз с легким нажатием. Петля должна оставить на стекле тонкую полоску клинического материала. Образец из препуциального мешка берется ватным/дакроновым тампоном.

Правила забора клинического материала у женщин для микроскопического исследования

Образец из уретры для окрашивания по Граму или метиленовым синим берется с помощью бактериологической петли объемом 1 мкл. При наличии большого количества выделений наружное отверстие должно быть очищено с помощью марлевого тампона. При отсутствии свободных выделений может быть проведен легкий массаж уретры, выполняемый врачом. После введения пластиковой петли в уретру на 1-2 см необходимо плоскость «глазка» петли двигать к отверстию, слегка нажимая на заднюю и боковые стенки уретры. Не рекомендуется вращать петлю во время процедуры взятия образца. Для пациентки это болезненно. После получения клинического материала петля накладывается на поверхность стекла и передвигается по нему несколько раз с легким нажатием. Петля должна оставить на стекле тонкую полоску клинического материала. Образец из цервикального канала для приготовления окрашенных препаратов берется в зеркалах ватным/дакроновым тампоном, специальной щеточкой или ложечкой. Необходимо тщательно очистить наружное отверстие цервикального канала при помощи большого марлевого тампона от вагинальных выделений для предотвращения возможной контаминации. После введения тампона в шеечный канал на 1-2 см его вращают несколько раз. Клинический материал должен быть перенесен с тампона на стекло как можно более тонким слоем. Для микроскопического исследования окрашенных вагинальных мазков материал берется в зеркалах с заднего или боковых сводов бактериологической петлей 10 мкл и тонким слоем распределяется на предметном стекле.